<li id="xsfu6"></li>
      1. <dd id="xsfu6"></dd>

        <dd id="xsfu6"><center id="xsfu6"></center></dd>
      2. <nav id="xsfu6"><big id="xsfu6"></big></nav>

        <strong id="xsfu6"><code id="xsfu6"></code></strong>

        歡迎來到 阿儀網

        免費注冊

        首頁 | 產品 | 求購 | 資訊 | 專題 | 找廠商 | 打聽 | 人才 | 品牌 | 資料 | 技術文獻 | 展會 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促銷 | 書籍 | 招標 | 優質儀器
        廣告

        天津本生詳述PCR技術原理、實驗步驟和應用

        提供者:本生(天津)健康科技有限公司   發布時間:2021/7/6 10:12:31  閱讀次數:78次   進入該公司店鋪

        天津本生詳述PCR技術原理、實驗步驟和應用

          實驗目的

          1.掌握聚合酶鏈式反應的原理。

          2.掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術。

          二、實驗原理

          PCR技術,即聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction,PCR)是由美PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術可在試管內的經數小時反應就將特定的DNa段擴增數百萬倍,這種迅速獲取大量單核酸片段的技術在分子生物學研究中具有舉足輕重的意義,大地推動了生命科學的研究進展。它不僅是DNA分析zui常用的技術,而且在DNA重組與表達、基因結構分析和功能檢測中具有重要的應用價值。

          PCR可以被認為是與發生在細胞內的DNA復制過程相似的技術,其結果都是以原來的DNA為模板產生新的互補DNAde片段。細胞中DNA的復制是個非常復雜的過程。參與復制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復制反應,基本原理與細胞內DNA復制相似,但反應體系相對較簡單。

          PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:

         、倌0錎NA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;

         、谀0錎NA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;

         、垡锏难由欤篋NA模板--引物結合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。

          重復循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成個循環需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

          三、實驗試劑與器材

          模板DNA、2.5mmol/LdNTP

          TaqDNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物

          10×buffer、15mmol/LMg2+、ddH2O

          PCR儀、移液槍、PCR板

          四、實驗步驟

          1、配制20μL反應體系,在PCR板中依次加入下列溶液:

          模板DNA2μL

          引物11μL

          引物21μL

          dNTP1.5μL

          MgCl22μL

          10×buffer2μL

          ddH2O10μL

          Taq酶0.5μL

          2、設置PCR反應程序。

          3、上樣,啟動反應程序。

          4、擴增產物的電泳檢測。

          PCR技術原理、實驗步驟和應用!先和大介紹到這,如果想要了解更多PCR的信息,可以關注天津本生生物,業給生物醫藥客戶提供生物實驗室檢測耗材,歡迎廣大客戶來詢。

        我要索取聯系方式

        優質商品

        X射線熒光光譜儀
        X射線熒光光譜儀

        版權聲明

        凡本網注明"來源:阿儀網"的所有作品,版權均屬于阿儀網,未經本網授權不得轉載、摘編或利 用其它方式使用。已獲本網授 權的作品,應在授權范圍內使用,并注明"來源:阿儀網"。違者本網將追究相關法律責任。

        本信息由注冊會員:本生(天津)健康科技有限公司發布并且負責版權等法律責任。

        旗下頻道

        色譜儀 光譜儀 反應釜 試驗箱 試驗機 攪拌器 培養箱 離心機 水分測定 氣體檢測 量熱儀 石油儀器 純水器 比表面儀 溫度記錄 流量計 萬用表 顯微鏡 粒度儀 測厚儀 硬度計 酸度計 元素分析 生物試劑 電線電纜 天平衡器 傳感器 食品檢測 壓力儀表 電化學 測厚儀 閥門儀表 電力儀表 干燥設備 藥物檢測